Гвидо родился в большой семье. У него было три сводных брата. Его отец, Джулио Маннари, был фермером и работал на местной ферме. Его мать Лина была одной из самых красивых женщин в городе. Прежде чем начать актёрскую карьеру, Маннари был полупрофессиональным футболистом и играл за местную команду. Он был защитником в Unione Sportiva Città di Pontedera.

Гвидо Маннари переехал в Рим в юном возрасте и решил стать актёром, вдохновившись фильмом «Нападение», который снимался в Кастильончелло, его родном городе. После непродолжительной работы в авангардном театре в столице он решил отправиться на год в Соединённые Штаты, чтобы освоить свою будущую профессию.

Проведя год в Америке, он вернулся в Италию и дебютировал в фильме «Арабелла» (1967) режиссёра Мауро Болоньини. Затем Болоньини выбрал его на роль в сцене изнасилования в итальянском драматическом фильме «Абсолютная натура» (в международном прокате — «Он и она» и «Она и он»). Эта сцена вызвала небольшой скандал и положила начало его карьере. Он был моделью и снимался для модных журналов. Он также позировал для Playmen и Party.

Гвидо получил роль Макрона в фильме «Калигула» режиссёра Тинто Брасса. Благодаря своей привлекательной внешности и таланту Маннари идеально подходил на эту роль. Гвидо Маннари свободно говорил по-английски, но из-за акцента его дублировал Патрик Аллен. В сцене, где Макрон присягает Калигуле на верность, Маннари держал руку над открытым огнём достаточно долго, чтобы сильно обжечься.

Гвидо Маннари состоял в отношениях с Элизабет Тейлор, с которой познакомился во время съёмок фильма «Место водителя» в 1974 году. Но это был короткий роман.

После 35 лет его перестали приглашать на главные роли из-за лишнего веса.

Маннари сыграл несколько главных ролей, но его карьера в основном ограничивалась традиционными ролями красавцев-соблазнителей. К концу жизни он стал очень религиозным. Он стал членом Свидетелей Иеговы. Гвидо Маннари умер от сердечного приступа в возрасте 43 лет в Кастильончелло.