Стерлинг Прайс Холлоуэй-младший родился 4 января 1905 года в городе Седартаун, штат Джорджия. Отец — Стерлинг Прайс Холлоуэй, дед по отцовской линии — известный адвокат, плантатор и политик Стерлинг Прайс, мать — Ребекка ДеХэвен. Семья владела магазином в Седартауне, а Холлоуэй-старший в 1912 году даже был мэром города.

В 1920 году Холлоуэй окончил Woodward Academy (в то время Военная академия Джорджии) и в возрасте 15 лет уехал в Нью-Йорк, где поступил в Американскую академию драматических искусств (окончил в 1923 году). Там он подружился с сокурсником, будущим известным актёром Спенсером Трейси, часто снимался с ним в дальнейшем. В середине 1920-х годов выступал на Бродвее, в частности, в мюзикле The Garrick Gaieties[1]. В 1926 году уехал в Голливуд, и в том же году началась его кино-карьера, продлившаяся 60 лет. Кустистые рыжие волосы и высокий пронзительный голос (почти фальцет) определили амплуа актёра как комедийное. Поначалу Холлоуэй снимался в немых короткометражках, часто без указания в титрах. В 1941 году впервые попробовал себя как актёр озвучивания в мультфильме «Дамбо», опыт оказался успешным, его стали часто приглашать на озвучивание анимационных лент.

В 1942 году был призван в армию, отслужил два года в Северной Африке и Италии, служба его была связана с постановкой и показом шоу для военнослужащих.

Стерлинг Холлоуэй никогда не был женат, но он усыновил ребёнка по имени Ричард. Скончался актёр 22 ноября 1992 года от остановки сердца. Согласно завещанию его тело было кремировано, а прах развеян над океаном.